Autoklaavien sterilointi Tehokkuus

Yksi mikrobiologisen laboratorion välttämättömimmistä välineistä on sterilointiaine, jossa autoklaavi (korkeapaineinen höyrysterilaattori) käytetään yleisimmin. GB 4789.1-2016: n mukaan laboratoriolaitteet on tarkistettava ja/tai kalibroitava säännöllisesti (tarkastustunnisteilla), ylläpidettävä ja huolehtia asianmukaisen suorituskyvyn ja toiminnan turvallisuuden varmistamiseksi. Mutta onko autoklaavi suorittanut tällaiset tarkastukset? Ja jos haluat suorittaa varmennuksen, miten sinun pitäisi tehdä se? Tänään tiivistämme avainmenetelmät autoklaavien sterilointihoidon todentamiseksi.

Autoklaavin sterilointin tehokkuuden todentaminen sisältää yleensä menetelmiä, kuten kemiallinen indikaattori, maksimilämpömittari, itsetehty lämpötilaputki ja biologinen indikaattori. Vaikka näillä menetelmillä on samanlaiset periaatteet - vahvistetaan, saavuttaako sterilointin vaadittava lämpötila steriloinnin aikana - voit valita yhden tai useamman laboratorion erityisolosuhteiden perusteella.

1. Kemiallisen indikaattorimenetelmä

Periaate: Kemialliset indikaattorit läpikäyvät värin tai muodonmuutoksen tietyissä lämpötiloissa ja aika -olosuhteissa. Tätä muutosta käytetään määrittämään, onko sterilointiparametrit saavutettu.

Yleisesti käytetty esine laboratorioissa on 3M: n autoklaavi -indikaattoriteippi, joka muuttaa väriä steriloinnin jälkeen. Nauha on valmistettu lämpöherkkistä kemikaaleista, värikehittäjistä ja maalimateriaaleista, painettuna raitakuvioon liimateipille. Sitä sovelletaan suoraan sterilointipaketin ulkopuolelle, minimipituus on 5 cm. Paina teippi kevyesti varmistaaksesi hyvän tarttumisen ja tiivistyksen. Sen jälkeen kun se on altistunut 121 ° C: lle 20 minuutin tai 130 ° C: n ajan 4 minuutin ajan, teipillä olevien diagonaalisten valkoisten raitojen tulisi muuttua täysin mustaksi. Jos värinmuutos on epätasainen tai puutteellinen, pakkausta ei pidetä oikein steriloituna.

2. Suurin lämpömittarin menetelmä

Periaate: Tämä menetelmä käyttää elohopealämpömittaria, joka ei palaa alhaisempaan lämpötilaan lämmitettynä, samanlainen kuin perinteinen lääketieteellinen lämpömittari. Se osoittaa steriloinnin aikana saavutetun maksimilämpötilan.

Varmistamiseksi aseta elohopealämpömittari vettä täytetyn Erlenmeyer-pullon sisään. Steriloinnin aikana aseta pullo autoklaavin ylä- ja alaosaan. Prosessin jälkeen tarkista, vastaako lämpömittarin lukeminen vaadittua lämpötilaa. Tämä menetelmä voi vain tarkistaa lämpötilan eikä voi vahvistaa, täyttivätkö sterilointiajan vaatimukset, joten se edustaa vähimmäisstandardia autoklaavien todentamiselle.

3. Itse tekemä lämpötilaputken menetelmä

Periaate: Tässä menetelmässä hyödynnetään tiettyjä kemikaaleja, jotka sulavat ja kiteytyvät uudelleen tietyissä lämpötiloissa, erottuvilla kidemuodoilla jälkijäähdytys. Nämä kemikaalit on suljettu pieniin lasiputkiin ja asetetaan autoklaavaan. Steriloinnin jälkeen kidemuotoa tutkitaan sen määrittämiseksi, saavutettiinko oikea lämpötila.

Bentsoehappoa käytetään yleisesti, sulamispisteen ollessa 121–123 ° C, joka kohdistuu autoklaaven tavanomaiseen sterilointilämpötilaan. Kiinteä bentsoehappo suljetaan pieniin lasiputkiin ja asetetaan autoklaavaan. Steriloinnin jälkeen havaitaan bentsoehapon tilan vahvistamiseksi, saavutettiinko kohteen lämpötila. Kuten suurin lämpömittarin menetelmä, tämä lähestymistapa varmistaa vain lämpötilan, ei steriloinnin keston.

4. biologinen indikaattorimenetelmä

Periaate: Tämä menetelmä käyttää geobacillus stearothermophilus -yritysten ei-patogeenisiä itiöitä indikaattoriorganismeina lämpösteriloinnin tehokkuuden arvioimiseksi. Nämä itiöt ovat erittäin lämmönkestäviä, ja resistenssi on samanlainen kuin patogeenisten Clostridium botuliini-itiöiden, mikä tekee niistä sopivia indikaattoreita steriloinnin tehokkuuden todentamiseksi.

Biologisia indikaattoreita on saatavana kolmessa muodossa: itiö suspensiot, itiöliuskat ja integroidut itiö- ja keskisuuntaiset putket. Ne sijoitetaan tyypillisesti viiteen sijaintiin sterilointiastissa: alakerroksen etu-, keskimmäinen ja takaosa, samoin kuin ylä- ja keskikerrosten keskipisteet. Steriloinnin jälkeen indikaattorit ympätään bromokresoliin violetti-glukoosi-peptonivesiin ja inkuboituna 55–60 ° C: ssa 2–7 päivän ajan. Jos väliaine pysyy selkeänä ja muuttumattomana, itiöt tapettiin, mikä osoittaa hyvää sterilointia. Jos väliaine muuttuu keltaiseksi ja sameaksi, itiöt selvisivät, mikä viittaa huonon sterilointi suorituskykyyn. Sekä itiö suspensiot että itiöliuskat seuraavat samaa validointiprosessia.

Kaupallisia biologisia indikaattoriputkia käytetään myös yleisesti laboratorioissa. Ne sisältävät Geobacillus stearothermophilus -itiöitä ja suljettua lasi ampullia kasvualustalla. Putket asetetaan koko sterilointiastian. Autoklatsin jälkeen lasi -ampulli murskataan väliaineen vapauttamiseksi, ja putkea inkuboidaan 56 ° C: ssa positiivisen kontrollin rinnalla. Jos sterilointi on riittämätöntä, eloonjääneet itiöt kasvavat ja muuttavat lieme keltaiseksi. Jos sterilointi on tehokasta, itiöt inaktivoidaan ja liemi pysyy violetina.

Varmennustaajuus

Tällä hetkellä autoklaavien tehokkuuden todentamisen taajuudesta ei ole tiukkaa kansallista standardia. Laboratorioiden odotetaan luovan omat varmennusaikataulunsa ja noudattavan tiukasti heitä. Kun otetaan huomioon sekä tulosten helppokäyttöisyys että luotettavuus, suosittelemme indikaattoriteipin käyttöä yhdessä biologisten indikaattoriputkien kanssa, koska ne tarjoavat yksinkertaisen toiminnan ja steriloinnin tehokkuuden kattavan todentamisen.

Sterilointia koskevat huomautukset (ei vaadita joillekin tuodulle täysin automaattisille autoklaveille)
Kun käytetään korkeapaineista höyrysterilointia, on ratkaisevan tärkeää karkottaa kaikki kylmä ilma kammion sisällä, kun höyry vapautuu. Vasta kun kaikki kylmä ilma on poistettu, pakoventtiili on suljettu. Jos jokin ilma on jäljellä, painemittari voi osoittaa oikean paineen, mutta kammion sisällä oleva todellinen lämpötila jää alle. Mitä enemmän ilmaa säilytetään, sitä suurempi ero paineen ja lämpötilan välillä, mikä mahdollisesti johtaa epätäydelliseen sterilointiin. (Tätä havaitaan usein käymisvälineiden steriloinnin aikana, jossa ilmakuplat pysyvät pienissä opasputkissa - yritä tyhjentää kylmää ilmaa perusteellisemmin.)